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國立陽明交通大學研究發展處

共軛焦顯微鏡類

  • 更新日期:113-06-26
  • 發布單位:儀器資源中心
[陽明校區] 雷射掃描共軛焦顯微鏡 Zeiss LSM900 with Airyscan2
雷射掃描共軛焦顯微鏡 Zeiss LSM900
  • Inverted Laser Scanning Confocal Microscope with Airyscan
  • 儀器位置:圖資大樓6樓 639室
  • 負責人:陽明校區影像核心設施專員
  • 使用資格:日間時段由專員協助上機
    • 詳見收費標準
  • 預約 >>> 儀器預約系統
 
顯微鏡系統(Microscope):
全電動倒立式顯微鏡Axio Observer 7電動XY平台,可進行樣品大面積拼圖、多位置應用

物鏡(Objective):
  • Plan-Apochromat 5x/0.16 M27
  • Plan-Apochromat 10x/0.45 M27 DIC
  • Plan-Apochromat 20x/0.8 M27 DIC
  • Plan-Apochromat 40x/1.3 Oil M27 DIC
  • Plan-Apochromat 63x/1.4 Oil M27 DIC (WD=0.19mm),支援Airyscan
  • Plan-Apochromat 100x/1.4 Oil M27 DIC
雷射波長(Laser (nm)):
Diode laser 405 nm, Diode laser 488 nm, Diode (SHG) laser 561 nm, Diode laser 640 nm

感測器(Detectors):
  • 採 VSD (Variable secondary dichroic) 波長可變式分光濾鏡技術,可變化波長範圍為 420 nm至 630 nm
  • 含兩組GaAsp 超高敏感度感測器、一組32-channel 矩陣式GaAsp超高解析掃描感測器(註1)與一組T-PMT高感度穿透光影像專用感測器(可拍攝明視野BF或微分干涉DIC影像)
  • AxioCam 702 MONO:高解析度、高靈敏度螢光專用黑白CCD,可供活細胞長時間攝影(註2)

活細胞培養(Live-cell Incubation):
小型活細胞培養系統 PM S1全罩式與小型活細胞培養系統,具溫濕度及CO2控制模組
上圖為[小型活細胞培養系統 PM S1] 直接架設於載物台上,二氧化碳穩定控制濃度範圍0.0%至10.0% (±0.1%),適用於底部為0.17mm玻璃蓋玻片之直徑30~60mm培養皿、76x26mm標準玻片與多孔盤等。
  • 如需使用活細胞系統,初次預約前請先來電詢問管理員。
  • 具Definite Focus 2 自動焦距維持系統影像軟體。

影像軟體(Software):
  • Zen 3.2 (Blue) 影像擷取分析
  • 備有離線電腦工作站可供影像處理與分析

註1. 矩陣式超解析掃描感測器32-channel Airy Scan 2:超解析顯微鏡感測器具多樣性的2Y以及4Y模式可供選擇,在4Y模式下,掃描速度可達 18.9幅/秒 (512 x 512 pixels) 或以上,速度比前代提升且檔案較小。
矩陣式超解析掃描感測器32規格書
 
 
AiryScan為ZEISS最新影像技術
一般傳統共軛焦影像是利用針孔光圈(pinhole) 濾除非焦距面的光;AiryScan為ZEISS最新影像技術,利用32通道之平面探測器同時收集一訊號源的所有光,因為每個探測器可被視為極小的單針孔光圈,而能突破光學極限,以使用488nm激發光為例,可將XY軸解析力提升至140 nm、Z軸400 nm,提升影像品質。此功能尚未開放認證操作,如需使用將由儀器中心管理員代為操作。

註2. 活細胞長時間螢光顯微鏡影像擷取功能需先通過雷射共軛焦顯微鏡認證,目前僅開放認證者於上班日來電預約週末使用
  • Super Resolution (AiryScan)
  • Colocalization
  • 3D imaging
  • Time-lapse imaging
  • Photo Bleaching (FRAP, FLIP, FRET, Photoactivation, Photoconversion),
  • Linear unmixing, etc.
【注意】雷射共軛焦顯微鏡為貴重儀器,儀器操作有專人代為服務,除AiryScan功能外,亦開放自行操作認證,使用者須先經過教學且通過認證考試,並於日間時段自行操作5次(含)以上,始能依規定使用,未認證者或冒用他人帳號皆視同違規。通過認證操作者若間隔一個月未使用儀器,須再次重新驗證儀器操作考試。
 
  1. 預約規定:
    • 使用前請至儀器中心「儀器預約系統」進行預約,預約者須為實際使用者。
    • 使用後務必確實登記紀錄本。起始時間為預約時間,終止時間則視實際結束使用時間為準。不可延遲上機時間或佔用他人時段
    • 不可當日取消預約,預約時間逾時半個小時不到者亦視同放棄。
    • 不接受當日預約使用,最遲請於前一個工作天16:30前確定,逾時變更視同違規,不予接受。
  2. 樣品規定:
    • 務必使用0.17mm ( No.1.5) 玻璃蓋玻片之培養皿或玻片樣本。
    • 上機前請先確定樣品已確實封片,並請先使用螢光顯微鏡確認樣品具螢光表現;若因樣本自身因素導致無法服務,中心仍會按照開機時數收費。
    • 若有其他需求或特殊使用需求,請詢問儀器中心管理員,以提供相關諮詢服務。
開放時間
  周一至周五 周末
上午時段 08:30-12:00 開放登記使用 活細胞螢光顯微鏡長時間攝影優先使用,請於上班時間來電預約。
下午時段 13:30-16:30 開放登記使用
夜間時段 16:30-隔日8:30 限認證使用者預約登記
                 
儀器收費 (NTD per hour)
雷射共軛焦顯微鏡 (Z) LSM880 (Z) LSM900 (O) FV1000
(Z) LSM700
(O) FV10i (Z) LSM7MP
  日間 夜間 活細胞
螢光顯
日間 夜間 活細胞
螢光顯
     
限認證自行操作   V V   V V V V V
校內師生收費 900 500 300 800 600 300 500 300 1000NTD
建教合作收費 1350 -- 450 1200 -- 450 750 450 1500NTD
其他單位收費 1800 -- 600 1600 -- 600 1000 600 2000NTD
備註
  1. 廠牌縮寫:(O) Olympus, (Z) Zeiss
  2. 預約次數:兩周內每人每台儀器可預約四次,可連續預約。
    每時段可預約時數:880夜間/900夜間/7MP-三小時;880/900活細胞螢光顯-四小時;其他機種時段每次最多可預約兩小時。
  3. 日間時段自08:30至16:30止,夜間時段自16:30至隔日08:30止。
  4. 如有長時間連續拍攝需求,須事先聯絡儀器中心管理員。
  5. LSM 7MP 開放時段為09:00至17:00,如需於夜間自行操作,須事先告知儀器中心管理員。
  6. 除了中心舉辦之影像核心設施教育訓練外,預約教學與認證考試建議自備樣品(實驗數據可帶走),並比照一般上機使用收費。
  7. 上表為每小時使用費,收費計算以每半小時為單位。

若具以下資格者,收費比照【本校師生】:
  1. 分校 
  2. 合聘教師  
  3. 附設醫院  
  4. 與本校有計畫合作且計畫屬本校管控
若具以下資格者,收費比照【建教合作單位】:
  1. 兼任教師 
  2. 教學醫院(榮民總醫院、臺北市立聯合醫院、亞東醫院等)
  3. 台聯大系統
  4. 產學運籌中心進駐廠商
儀器以每半小時為收費單位,每奇數月月底統計開單,最遲請於兩週內,攜帶繳費單至行政大樓出納組繳費,領取收據,逾期次數達(含)兩次者,將停止對該實驗室提供服務。
  1. 本機禁用隨身碟,可用 FTP 傳輸檔案或請自行攜帶空白光碟片燒錄資料。由於電腦硬碟空間有限,為有利儀器之正常操作,管理人員將不定時刪除資料,本中心不負責資料保管,敬請見諒。
  2. 未經本中心管理員同意,不得擅自於本中心公用儀器上加裝或拆換任何零件、更改系統設定及安裝軟體。若因實驗需要進行任何測試,須先徵求管理員同意,並由原廠工程師陪同,在不傷害正常儀器操作之情況下進行測試,通過測試後方可在本中心管理員許可情況下,由管理員認可之人員操作使用。
  3. 依管理員判定違規者第一次警告、第二次取消使用權一個月、第三次永久取消使用權;如違反上述規範,以致儀器損壞者,需照價賠償以利修復儀器,並停止使用權一個月,再違規者則永遠禁止使用。
  • Certification form-confocal_2022
  • LSM900 Zen Blue 影像擷取分析(簡易操作手冊)
    • LSM900-ZEN blue manual
  • 聯絡人: [ 影像核心設施專員 分機 66185]
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