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國立陽明交通大學研究發展處

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分選儀

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  • 更新日期：114-01-15
  • 發布單位：儀器資源中心
[陽明校區] 流式細胞分選儀 BD FACS Melody
流式細胞分選儀 (Cell Sorter)-BD FACS Melody
  • 儀器位置： 陽明校區 生物醫學大樓 311室
  • 使用資格：
    • 本機採認證方式
    • 代操作使用
  • 預約 >>> 儀器預約系統
  • 流式細胞核心設施　負責人
配備三種雷射光源，波長為 488nm、561nm 及 633nm。
三種雷射詳細內容
  • 參加暑期BD專員講授原廠實機操作教學，或是觀看中心網頁上原廠實機操作教學影片，並且經過BD專員或是中心專員或是已取得使用資格之實驗室同學實機教學後跟中心申請認證
    • 認證流程
      1. 3次實機操作演練：第一次演練請與中心專員預約（Ext: 66473 趙先生），第二次及第三次請與種子教官預約*
      2. 完成3次實機演練後，請與中心專員預約實機操作考試（最晚3個工作日前預約）。
      3. 通過實機操作考試後，方取得儀器預約及自行操作資格。
    • 注意事項
      • 請自行準備樣本進行認證
      • 認證內容包含了解機器工作原理、開機前準備工作、標準開機流程、使用軟體操作樣本採樣分析、故障及突發狀況排除, 使用後關機及清潔、檔案輸出，以及使用狀況的記錄。
      • 實機演練三次需收費
  • 種子教官：
    • 徐嘉琳老師實驗室：蔡沛芫、范琇涵、黃深彥、馬語謙分機 (分機65619，Lab309)
  • 認證請先下載 FACSMelody使用申請書
儀器預約

一、

本機採24小時開放，使用前請至儀器資源中心預約系統進行預約。

二、

預約者需為實際使用人，不得替代預約。

三、

最早可於14天前預約，最多可預約3個時段，每個時段最多4小時。

四、

需代操者最晚三工作天前預約，代操預約使用時段為平日 09:00-11:30, 13:30-16:00 (1200-1300恕不開放)

五、

預約時間逾時半小時不到者視同放棄
 
使用注意事項
  1. 使用人員請自行準備「流式細胞分析儀液流校正磁珠(BD FACS Accudrop Beads, BD#661612)。
  2. 請確實依照儀器正確開關機步驟，不可自行修改省略。(現場備有清潔用棉花棒、Rinse Buffer, Clean Buffer, dd water, Detergent)
  3. 管理單位會固定會進行機器清洗保養工作.
  4. 儀器使用完畢後，請使用者確實關機、補充PBS並倒廢液，未關機者將追討儀器耗損費用。
  5. 務必確實登記紀錄本 (起始時間及終止時間請按照規定登錄)，以便管理及統計計費；離開前請清潔儀器內外以及桌面，並將垃圾及其他自有物品帶離。
  6. 若使用當下儀器出現異常請立刻停止使用，並連繫儀器管理人員。
  7. 儀器資源中心備有監視系統進行24小時監測，若未確實執行上述要點，除將處以罰責外，如有損壞應負責賠償事宜。
  8. 代操作預約管理事項等同其他流式細胞分選儀
  9. 上樣時若Sample蓋子無取下造成上樣管變形者，將照價賠償
  10. 使用者自行準備的物品：Pipette, Pipette Tips, 擦手紙、拭鏡紙、FACS tubes、存檔用光碟、Accudrop
開放時間
  周一至周五 周末/假日
自行操作 00:00-24:00 00:00-24:00
代操服務
(最遲3工作天前來電預約)		 09:00-11:30
13:30-16:00		 不開放
　　　 　　 　　 　　 　　 　　
收費標準
流式細胞 廠牌型號 說明 (單位：NTD) 本校師生 建教合作單位 一般校外單位
分選儀 cell sorter BD FACS Melody (自收) 每半小時 300 450 600
BD FACS Melody (代收)
Beckman CytoFLEX SRT (代收)		 每半小時 400 600 800
代收須另加開機費 每次 1000 1500 2000
分析儀 flow cytometry BD FACS Calibur (自收) 每半小時 210 315 420
Beckman CytoFLEX (自收) 每半小時 140 210 280
Beckman CytoFLEX (代收) 每管 200 300 400
  • 若具以下資格者，收費比照【本校師生】：
    1. 分校 
    2. 合聘教師
    3. 附設醫院 
    4. 與本校有計畫合作且計畫屬本校管控
  • 若具以下資格者，收費比照【建教合作單位】：
    1. 兼任教師
    2. 教學醫院（榮民總醫院、臺北市立聯合醫院、亞東醫院、振興醫院等）
    3. 台聯大系統  
    4. 產學運籌中心進駐廠商

一、

細胞濃度　　 　　 　　 　　 　　 　　
細胞濃度
Nozzle Cell type Cell concentration
100um All cells (Max. Size: 15μm) 1 × 107/ml

二、

使用者可依其需要使用各種不同的實驗流程，如抗體螢光標定 (antibody labelling) 或螢光基因轉染 (transfection)，但在上機前必須完成下列程序：
 
  1. 檢體務必先使用nylon mesh (mesh size: 45μm )過濾（建議使用 Falcon #352235含篩網管子或是#352340 40μm 篩網），過濾後之細胞置於 Falcon 12 × 75mm tube (Cat# 352052)中，濃度參見上表（最少分選體積為1 mL）。（注意：若未過濾樣品即上機而引起Nozzle堵塞及機器損壞，需負賠償之責任。若未過篩而造成機器阻塞無法上機，中心有權取消當次上機，且仍需收取上機費用）
  2. 若細胞分選後需再次培養，請準備含合適細胞培養基之收集管，於分選服務前交操作員。
  3. 需提供未經染色的相同細胞為控制組標本，以作為分選前儀器校正之用。
  4. 若欲以多重螢光染色執行分選，需提供各種單一螢光染色之標本作為分選前調整校正之用。
  • 【2020.09.28 BD_FACSMelody教育訓練】
  • 【BD_FACSMelody實機操作影片】
    *FACSMelody實機操作影片是由中研院生醫轉譯核心共儀的專案經理 張靜芳博士提供
  • 本機禁用隨身碟，可用 FTP 傳輸檔案或請自行攜帶空白光碟片燒錄資料。由於電腦硬碟空間有限，為有利儀器之正常操作，管理人員將不定時刪除資料，本中心不負責資料保管，敬請見諒。
  • 未經本中心管理員同意，不得擅自於本中心公用儀器上加裝或拆換任何零件、更改系統設定及安裝軟體。若因實驗需要進行任何測試，須先徵求管理員同意，並由原廠工程師陪同，在不傷害正常儀器操作之情況下進行測試，通過測試後方可在本中心管理員許可情況下，由管理員認可之人員操作使用。
  • 依管理員判定違規者第一次警告、第二次取消使用權一個月、第三次永久取消使用權；如違反上述規範，以致儀器損壞者，需照價賠償以利修復儀器，並停止使用權一個月，再違規者則永遠禁止使用。
  • 取得使用資格後連續三個月未操作機器，上機前請與管理人或種子教官聯絡陪同操作。
  • 唯有取得使用者資格的人才可操作機器。如有其他實驗室同仁需要使用，請將檢體交由認證使用者或預約中心操作員代為上機操作。
  • 使用本儀器的校內師生收費標準為每半小時300元計費；代操服務為開機費1000元，每半小時400元計費 （請參考中心申請代為操作注意事項）。每兩個月統計使用時數由中心統一向使用實驗室收取費用。
  • 儀器操作電腦僅限上機使用不得作他用。
  • 儀器操作電腦不負資料保管責任，上機完成後請立即匯出
  • 在操作期間若遭遇問題，請先停止操作並與種子教官群聯繫
  • 使用完畢請確實登記使用記錄（若有發現任何問題或是疑問，都請註記清楚），以維護你自身與所屬實驗室的權益。
  • 除非由中心人員或原廠確定操作失敗是因儀器造成，否則上機皆要收費
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  • 聯絡人： [ 流式細胞儀設施專員 分機 66473]
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