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國立陽明交通大學研究發展處

Real-time PCR

  • 更新日期:114-03-11
  • 發布單位:儀器資源中心
[陽明校區] 即時聚合酶鏈鎖反應儀 StepOnePlus™
StepOnePlus™ 即時聚合酶鏈鎖反應儀
  • 廠牌型號:ABI StepOnePlus™ 
  • 儀器位置:陽明校區
    • 生醫工程館467室 (L機)
    • 生物醫學大樓710室 (H機)
    • 圖資大樓615室 (J機)
    • 守仁樓B02室 (M機)
  • 使用資格:須事先預約
    • 校內免費,校外請洽中心人員
  • 預約 >>> 儀器預約系統
  • 聯絡中心人員:
 
簡介:

即時螢光定量 PCR 技術於 1996 年由美國 Applied Biosystems 公司推出,由於該技術不僅實現了 PCR 從定性到定量的飛躍,而且與常規 PCR 相比,它具有特異性更強、有效解決 PCR 污染問題、自動化程度高等特點,在後基因體時代的來臨,已廣泛利用 Real-Time PCR 技術來應用基因表現、病毒或病原菌偵測的實驗及 SNP genotyping Assay。

特有的實驗設計流程:Assay Development Guidelines 縮短尋找條件的時間並保障實驗的品質採用 Primer Express 設計 TaqMan Probe 與 Primer。採用 Optimized 定量 PCR 的試劑。採用標準化的 PCR 條件與反應濃度。可將 PCR 的效率提升至100%。

特點:
  1. 反應模式 快速模式僅需 40分鐘,也可採取標準模式 2小時內完成反應,最多完成 96個反應。
  2. 獨家 Veriflex 加熱塊技術,六道獨立控溫,讓你同時進行六種不同 PCR 的反應條件。
  3. 四色螢光偵測系統,輕鬆執行 Multiplex Real Time PCR 實驗。
  4. 軟體整合所有實驗應用 包含
    1. 絕對定量 (Standard Curve)
    2. 相對定量 (△△ Ct Method & Relative standard Curve)
    3. Melting Curve Analysis
    4. SNP genotyping Assay
    5. Presence/Absence Assay (定性判讀)
  5. 操作最簡便: 軟體介面直覺式引導設定 不需翻閱操作手冊。
StepOnePlus™ 即時聚合酶鏈鎖反應儀SYSTEM介紹
  1. 使用本機需事先預約。(請參閱預約規定)
  2. 上機前應先於使用登記簿上填寫各項資料,並於上機完成後儘速將樣品取回,否則樣品若有損壞請自行負責。
  3. 使用者不得在中心的電腦上進行下列操作:
    • 改動程式或參數,或他人的檔案。
    • 自行外接任何週邊設備。
    • 拷貝程式至中心電腦中執行(中心電腦中之程式皆為原版,有版權)。
    • 違者永遠停止使用,若造成損害,論校規處罰。
  4. 若上機時有任何問題,請詢問儀器中心技術人員。
  5. 限用0.1ml PCR 96 well plate or tube,若使用其他規格造成機器損害需負維修賠償責任!
  6. PCR 機器跑完實驗後 4小時會自動休眠,電腦會出現Instrument connection was lost為正常現象
  7. 如由電腦下載data不成功,請於下一位使用者使用前,以隨身碟從PCR主機下載data,避免資料遭覆蓋。
  8. 請於使用前確認機器收光功能為開啟模式,如誤點到該圖示會關閉data collection(圖示反灰),機器將不偵測實驗中的即時資訊。
此為機器收光功能預設開啟模式,如誤點到該圖示會關閉data collection(圖示反黑),機器將不偵測實驗中的即時資訊,故開始實驗前請確認此功能維持開啟
  1. 預約者須為真正使用人,不得頂替使用。
  2. 預約最早為二週前。(例如:今天星期二最早只能預約至下下星期一)
  3. 每人每次最多可預約兩個時段,且須間隔,每個時段最長不可超過 3小時。
  4. 在預約時段內30分鐘以上沒使用,視同放棄使用,他人得以隨時使用。
  5. 附屬配件取用或歸位時間,不得影響他人使用。
  6. 個人物品請帶走,勿留下sample。
請注意:
※ 取消預約須儘早取消,以免損及他人權益!若有經常預約不到又不先前取消者,經檢舉調查有習慣佔用之嫌者,本中心將嚴格限制其使用。
  • 分析軟體:StepOnePlus V2.3
  • 操作手冊:StepOnePlus 快速上機流程
  • 操作手冊:StepOnePlus 實驗建立流程
  • 操作手冊:StepOnePlus 簡易分析流程
  • Primer Express v3.0 中文操作手冊 (光碟可至中心借用)
  • 教育訓練講義(基礎)、(數據分析常見問題與Troubleshooting)
  • 教育訓練影片:儀器技術應用訓練-1(1:02:03)待補
  • 教育訓練影片:儀器技術應用訓練-2(53:36)待補
  • 官網教學影片
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