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國立陽明交通大學研究發展處

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其他特殊光學顯微鏡類

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  • 更新日期：114-01-15
  • 發布單位：儀器資源中心
[陽明校區] 超解析螢光顯微鏡含活細胞培養系統 Zeiss Elyra 7 with Lattice SIM²
超解析螢光顯微鏡含活細胞培養系統 Zeiss Elyra 7 with Lattice SIM2
  • Super-Resolution Microscope with Lattice SIM ² and Incubation System
  • 儀器位置：陽明校區 圖資大樓6樓 617室
    • 分機 66185
  • 負責人：陽明校區影像核心設施專員
  • 使用資格： 認證制
    • 須參加原理與儀器介紹課程、有confocal上機經驗，並經專員實機操作教學後，才能申請認證考試。
    • 須通過認證考試，並於日間時段自行操作5次(含)以上者，才具預約權限。
  • 校內使用每小時1300元，校外請見收費標準
  • 預約 >>> 儀器預約系統
  • 初次使用請先填寫樣品資訊調查表，待專員回覆確認時間。樣品測試：每實驗室同類型樣品限預約一次（測試/教學至多折抵兩小時收費），重複預約須依使用時段收費！
顯微鏡系統(Microscope):
  • 全電動倒立式顯微鏡 Axio Observer 7 SP
  • 具 Piezo xyz-stage
物鏡(Objective):
  • 10X (Apotome)
  • 20X (Apotome)
  • 40X oil (Apotome)
  • 63X oil (SIM)
  • 100X oil (TIRF)
雷射波長(Laser (nm)):
  • 405, 488, 561, 642
觀察模式(Observation Methods):
  • Apotome
  • Lattice SIM
  • TIRF
螢光濾鏡(Emission Filter):
  • 目鏡觀察：Filter set 77 HE GFP + mRFP + Alexa 633 shift free
  • 影像擷取：
    • Position 3: EF LBF 405/488/561/642
    • Position 4: BP 420-480 / BP 495-550 / LP 655
    • Position 5: EF BP 495-550/BP 570-620
    • Position 6: BP 420-480/LP 655
照相設備(Camera):
  • sCMOS
活細胞培養系統(Live-cell Incubation):
  • 全罩式與小型活細胞培養系統，具溫濕度及CO2控制模組
  • 小型活細胞培養系統架設於載物台上，二氧化碳穩定控制濃度範圍0.0%至10.0% （±0.1%），適用於底部為NO.1.5 (0.17mm)玻璃蓋玻片之直徑35mm培養皿與76x26mm標準玻片。
  • 如需使用活細胞系統，初次預約前請先來電詢問管理員。
  • 具Definite Focus 2 自動焦距維持系統影像軟體。
影像軟體(Software):
  • Zen
  • Super-resolution module: SIM, SIM2 模組
  • Apotome
  • 備有離線電腦工作站可供影像處理與分析
  1. Coverslip
    • We recommend using high-precision cover glasses with thickness no. 1.5 to prepare the samples.
      • Zeiss 474030-9010-000 Deckgläser 1,5H hi 100002240928 QS; Thickness no 1 ½ , high-performance 18 mm x 18 mm, 0.170 +/- 0,005 mm
        Usage specifications
      • Marienfeld Superior: www.marienfeld-superior.com
        • 18×18 mm (Cat.No. 0107032).22×22 mm (Cat.No. 0107052).
        • round with 18 mm diameter (Cat.No. 0117580).
    • Fix your cells according to your preferred protocol.
    • Please make sure that the cover slip is centered on the glass slide, in order to fit in our samples holder.
    • For glass-bottom petri dishes and multi-well plates see:
  2. Mounting Media
    • Suggested Hardening media:
      • ProLong™ Glass Antifade Mountant P36980   RI 1.52
      • ProLong™ Gold Antifade Mountant  P36930   RI 1.46
    • As it is a hardening media, you may also notice it can somewhat flatten samples.
    • Do not use mounting media that include DAPI.
    • Concerning the refractive index (RI) of the mounting medium, prepare the slides at least 2 days before imaging. Allowing the sample to have sufficient time for curing mounting media and sealant. (2–8°C)
    • The following Aqueous(Non-Hardening) Mounting liquid media also works, despite having a lower refractive index. SlowFadeGold /Diamond RI of 1,42. VectaShield H-1000. RI of 1,44
  3.  Fluorescent Labels for SR-SIM
All common types of organic dyes usually conjugated to antibodies or fluorescent proteins are suitable to be used for SR-SIM. For multicolor samples the fluorophores should be selected for minimal spectral overlap to avoid crosstalk.
  • 405 nm (50 mW),
  • 488 nm (100 mW),
  • 561 nm (100 mW),
  • 642 nm (150 mW)
Note： Cytosolic or other non-specific fluorescent protein expression (e.g. GFP) will result in staining of extended areas. Since well-defined structures are missing to interfere with the grid pattern, modulation contrast will be low and the final image will lack high resolution information.
SIM2
SIM Apotome
＊本機採認證制＊
須參加原理與儀器介紹課程、有confocal上機經驗，並經專員實機操作教學後，才能申請認證考試，認證考試通過後須於日間時段自行操作5次(含)以上者，才具預約與門禁權限。兩星期內每人最多可預約4次，每時段最多4小時。
  • 預約規定：
    • 初次使用請先填寫樣品資訊調查表，待專員回覆確認時間。
    • 樣品測試：每實驗室同類型樣品限預約一次（測試/教學至多折抵兩小時收費），重複預約須依使用時段收費！
    • 使用前請至儀器中心「儀器預約系統」進行預約，預約者須為實際使用者（不得使用他人證件進出）。
    • 儀器使用完畢須確實清潔、關機，並詳實填寫登記本。起始時間為預約時間，終止時間則視實際結束使用時間為準。
    • 不可延遲上機時間或佔用他人時段。
    • 最遲請於前一個工作天16:30前確定，逾時變更視同違規，不予接受。
    • 不可當日取消預約，預約時間逾時半個小時不到者亦視同放棄。
  • 週一至週五
    • 全天　限認證操作者登記使用
  • 週末
    • 暫不開放
　　 　　 　　 　　 　　 　　
儀器收費 (NTD per hour)
特殊光學顯微鏡 超解析影像系統含活細胞培養裝置
機型 (Z) Elyra 7
校內師生收費 1300
建教合作收費 1950
其他單位收費 2600
備註
  1. 廠牌縮寫：(Z) Zeiss
  2. 預約次數：兩周內每人每台儀器可預約四次，每時段最多四小時，可連續預約。
  3. 除了中心舉辦之影像核心設施教育訓練外，預約教學與認證考試須自備樣品（實驗數據可帶走），並比照一般上機使用收費。
  4. 上表為每小時使用費，收費計算以每半小時為單位。
  5. 樣品測試：每實驗室同類型樣品限預約一次（測試/教學至多折抵兩小時收費），重複預約須依使用時段收費！

若具以下資格者，收費比照【本校師生】：
  1. 分校 
  2. 合聘教師  
  3. 附設醫院  
  4. 與本校有計畫合作且計畫屬本校管控
若具以下資格者，收費比照【建教合作單位】：
  1. 兼任教師 
  2. 教學醫院（榮民總醫院、臺北市立聯合醫院、亞東醫院、振興醫院等）
  3. 台聯大系統
  4. 產學運籌中心進駐廠商
儀器以每半小時為收費單位，每奇數月月底統計開單，最遲請於兩週內，攜帶繳費單至行政大樓出納組繳費，領取收據，逾期次數達（含）兩次者，將停止對該實驗室提供服務。
  1. 本機禁用隨身碟，可用 FTP 傳輸檔案或請自行攜帶空白光碟片燒錄資料。由於電腦硬碟空間有限，為有利儀器之正常操作，管理人員將不定時刪除資料，本中心不負責資料保管，敬請見諒。
  2. 未經本中心管理員同意，不得擅自於本中心公用儀器上加裝或拆換任何零件、更改系統設定及安裝軟體。若因實驗需要進行任何測試，須先徵求管理員同意，並由原廠工程師陪同，在不傷害正常儀器操作之情況下進行測試，通過測試後方可在本中心管理員許可情況下，由管理員認可之人員操作使用。
  3. 依管理員判定違規者第一次警告、第二次取消使用權一個月、第三次永久取消使用權；如違反上述規範，以致儀器損壞者，需照價賠償以利修復儀器，並停止使用權一個月，再違規者則永遠禁止使用。
  • 儀器介紹：EN_product-info_Elyra-7
  • 儀器操作手冊：Manual (20230314 version)
  • 認證操作申請單：Certification form
    • Manual (20230314 version)
  • 原理與儀器介紹：The New Era of Super-resolution Microscopy, Elyra 7
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  • 聯絡人： [ 影像核心設施專員 分機 66185]
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